Теперь посмотрим на эту последовательность действий с молекулярно-биологической точки зрения.

Для того, чтобы какую-то молекулу ДНК специфическим образом вставить в другую молекулу ДНК, требуется эти молекулы специальным образом по отдельности разрезать, затем смешать и сшить. Специфическое разрезание молекул ДНК происходит в процессе рестрикции, сшивание молекул ДНК происходит в процессе лигирования.

Почему исследователям необходимо резать и сшивать молекулы ДНК по строго определенным сайтам? Как уже говорилось ранее, целью молекулярного клонирования является получение молекулы с новыми свойствами. Свойства молекулы ДНК во многом определяются последовательностью нуклеотидов, входящих в ее состав. Значит, для привнесения в имеющуюся молекулу ДНК определенного свойства требуется взять определенную, не случайную последовательность ДНК.

На рисунках схематически изображены все стадии молекулярного клонирования:

Цифрами на рисунке обозначены:

• Векторная молекула ДНК(чаще всего — бактериальная плазмида)
• Источник ДНК-вставки
• Векторная молекула ДНК после рестрикции
• ДНК-вставка после рестрикции
• Векторная молекула, содержащая вставку — продукт лигирования